کیت سنجش FSH به روش الایزا | نام |
تعیین کمی غلظت FSH به روش الایزا در سرم انسان | نام کامل کیت |
Fertility ELISA kits | نام دسته |
96 | تعداد تست |
Sandwich ELISA | اساس آزمایش |
mlU/ml 100-0 | محدوده شناسایی |
lµ 20 نمونه سرم | نمونه |
mlU/ml 1 | حساسیت |
حدود 60 دقیقه | مدت زمان آزمایش |
12 ماه از تاریخ تولید | عمر مفید |
مواد موجود در کیت
1. پلیت پوشانده شده با آنتی بادی منوکلونال Anti-FSH: (1 پلیت، 96 چاهک).
2. معرف کونژوگه آنزیمی (1 ویال، ml 12)
3. استانداردها: 0, 5, 10, 25, 50, 100 mlU/ml در بافر حاوی نگهدارنده (6 ویال، 0.5میلی لیتری).
4. بافر شستشوی غلیظ: PBS-Tween (1 ویال 30 میلی لیتری،20X)
5. محلول سوبسترا- رنگزا: پروکسید هیدروژن و تترا متیل بنزدین (TMB). (1 ویال 11 میلی لیتری)
6. محلول توقف: اسید کلریدریک یک مولار (1 ویال،6 میلی لیتر).
7. سرم کنترل: FSH در سرم به همراه نگهدارنده (1 ویال،0.5 میلی لیتر).
موادی که در کیت وجود ندارند:
1. میکروپیپتهای دقیق
2. آب مقطر
3. دستگاه الایزا ریدر دارای فیلتر 450 نانومتری و در صورت امکان 630 نانومتری بعنوان فیلتر رفرانس.
4. کاغذ جاذب رطوبت
مقدمه:
هورمون محرک فولیکول (FSH)گلیکوپروتئینی متشکل از دو زنجیره آلفا و بتا میباشد که توسط اتصالات غیرکوالانسی بهم متصل شدهاند. زنجیره آلفا از 98 آمینواسید ساخته شده است که از لحاظ ساختمانی با دیگر هورمونهای گلیکوپروتئینی (HCG, LH, TSH) مشابه است. زنجیره بتا که برای هر هورمون اختصاصی است مسئول فعالیت ایمونولوژی خاص FSH میباشد. FSH توسط سلول های بازوفیل هیپوفیز قدامی سنتز و ترشح می شود. هورمون رها کننده گنادوتروپین (GnRH) که از هیپوتالاموس ترشح می شود، رهایی FSH از هیپوفیز را تنظیم می کند. فعالیت هیپوتالاموس و هیپوفیز تحت تاًثیر غلظت استروئیدهای گردش خون کم و زیاد میشود (فیدبک منفی).
در زنان، FSH با اتصال به گیرنده های موجود در سطح سلول های گرانولوزا مستقیما باعث تحریک رشد و بلوغ فولیکول های تخمدان و ترشح استروژن از آن ها می شود. در سیکل قاعدگی سطح سرمی FSH از یک شکل دورهای متابعت میکند که منطبق بر تیتر خونی پروژسترون و استرادیول است. بفاصله کوتاهی قبل از تخمک گذاری، افزایش واضحی در مقدار FSH مشاهده میشود که همراه با افزایش LH باعث پاره شدن فولیکول بالغ میشود.
FSH در مردان تنظیم کننده اسپرماتوژنز است. برخلاف استروژن، هورمون های مردانه (آندروژن ها) غلظت FSH را کاهش نمی دهند و اثبات یک ارتباط فیدبک تنها از طریق LH امکان پذیر می باشد. به دلایلی که بخوبی شناخته نشده است، در مردان با آزواسپرمی و الیگواسپرمی غلظت FSH افزایش می یابد. در روش های ایمونواسی، در تومورهای بیضه معمولا غلظت FSH کاهش و غلظت LH افزایش را نشان می دهد. تصور می شود که این افزایش کاذب LH بواسطه واکنش متقابل با ترکیبات شبه hCG باشد که توسط تومور بیضه تولید می شود.
طراحی محصول:
اساس آزمون FSH ایمونوانزیمومتری است.
این تست به کمک آنتی بادی منوکلونال اختصاصی به روش ساندویچی طراحی شده است بدین صورت که یک انزیم منوکلونال Anti FSH برای تثبیت برروی فاز جامد و یک آنتی بادی Anti – FSH دیگر برای کونژوگاسیون برای تثبیت با آنزیم (HRP) مورد استفاده قرار گرفته است.با افزودن نمونه سرم مولکول FSH به طور همزمان با دو آنتی بادی فوق واکنش داده و بین آنتی بادی متصل به فاز جامد و آنتی بادی کونژوکه شده با آنزیم ساندویچ می گردد.
پس ازگذشت زمان انکوباسیون (45 دقیقه ) در دمای اتاق و شستشو چاهک ها توسط محلول شستشو دهنده و اضافه کردن محلول سوبسترا و محلول رنگزا و انکوباسیون به مدت 15 دقیقه رنگ آبی ظاهر می گردد.با اضافه کردن محلول متوقف کننده رنگ آبی به زرد تبدیل می شود.شدت رنگ در طول موج 450 نانومتر اندازه گیری می گردد.
شدت رنگ رابطه مستقیم با غلظت FSH در نمونه دارد.