HCG (Rapid) ELISA Kit

کیت سنجش Rapid HCG به روش الایزا نام
تعیین کمی غلظت Rapid HCG به روش الایزا در سرم انسان نام کامل کیت
Fertility ELISA kits نام دسته
96 تعداد تست
Sandwich ELISA اساس آزمایش
IU/L 1000-0 محدوده شناسایی
lµ 20 نمونه سرم نمونه
IU/L 2 حساسیت
حدود 15 دقیقه مدت زمان آزمایش
12 ماه از تاریخ تولید عمر مفید

کیت hCG جهت سنجش هورمونhCG در سرم انسان طراحی وساخته شده است

مواد موجود در کیت

1. پلیت پوشانده شده با آنتی بادی منوکلونال Anti-hCG: (1 پلیت، 96 چاهک).

2. معرف کونژوگه آنزیمی (2 ویال، ml 12)

3. استانداردها: 0, 20, 100, 250, 500, 1000 IU/L در بافر حاوی نگهدارنده (6 ویال، 0.5میلی لیتری). در مقابل استاندارد WHO IS 3rd 537/75 کالیبر شدند.

4. بافر شستشوی غلیظ: PBS-Tween (1 ویال 30 میلی لیتری،20X)

5. محلول سوبسترا- رنگزا: پروکسید هیدروژن و تترا متیل بنزدین (TMB). (1 ویال 11 میلی لیتری)

6. محلول توقف: اسید کلریدریک یک مولار (1 ویال،6 میلی لیتر).

7. سرم کنترل: hCG در سرم به همراه نگهدارنده (1 ویال،0.5 میلی لیتر).

موادی که در کیت وجود ندارند:

1. میکروپیپت­های دقیق

2. آب مقطر

3. دستگاه الایزا ریدر دارای فیلتر 450 نانومتری و در صورت امکان 630 نانومتری بعنوان فیلتر رفرانس.

4. کاغذ جاذب رطوبت

مقدمه:

هورمون گنادوتروپین جفتی انسان (hCG) گلیکوپروتئینی با وزن مولکولی 38000 دالتون است که توسط سلول های تروفوبلاست جفت در دوران بارداری سنتز می شود. hCG متشکل از دو زیرواحدآلفا و بتا می­باشد. زیرواحد آلفا hCG مشابه زیرواحد آلفا هورمون های LH، FSH و HCG انسانی است و زیرواحد بتا مسوول اثرات هورمونی اختصاصی مولکول hCG می باشد. بواسطه شباهت های ساختمانی، خصوصیات فیزیولوژیک و ایمونولوژیک hCG تقریبا مشابه هورمون LH است. hCG دارای اثرات لوتئوتروپیک بوده و شکل گیری جسم زرد را حمایت می کند. hCG همچنین عملکرد هورمونی بیضه و غده آدرنال جنین را تعیین می کند. hCG سرم در مراحل اولیه حاملگی ظاهر شده، غلظت آن تدریجاً افزایش می­یابد به طوریکه در سه ماهه اول به اوج خود می­رسد سپس بصورت پیشرونده تا زمان زایمان کاهش می­یابد. بنابراین اندازه گیری hCG خصوصاً در سه ماهه اول یک اقدام مهم برای پایش حاملگی است. علاوه بر تشخیص زودهنگام بارداری، اندازه گیری hCG همچنین در تشخیص بارداری های غیر طبیعی اهمیت دارد. در بارداری خارج رحمی نسبت به بارداری طبیعی سرعت افزایش hCG آهسته تر بوده و در سطوح پایین تری باقی می ماند. غلظت بالای hCG عموما در بارداری چند قلویی و در بیماران با تومورهای تروفوبلاست و غیر تروفوبلاست نظیر بیضه، پستان، کارسینوما برونشیال و سلول های رویانی مشاهده می شود.

اساس آزمایش:

اساس این کیت به روش ساندویچ و با استفاده از آنتی بادی های منوکلونال می باشد. در این سیستم از یک آنتی باید منوکلونال Anti-HCG جهت تثبیت برروی فاز جامد و یک آنتی بادی Anti-HCG جهت کونژوگاسیون با آنزیم ( HRP ( مورد استفاده قرار گرفته است.

پس از اضافه شدن نمونه سرم بیمارها مولکول HCG با آنتی بادی های منوکلونال واکنش داده و بین آنتی بادی متصل به فاز جامد و آنتی بادی کنژوکه شده با آنزیم ساندویچ می گردد.

پس ازگذشت زمان انکوباسیون (45 دقیقه ) در دمای اتاق و شستشو چاهک ها توسط محلول شستشو دهنده و اضافه کردن محلول سوبسترا و محلول رنگزا و انکوباسیون به مدت 15 دقیقه رنگ آبی ظاهر می گردد.با اضافه کردن محلول متوقف کننده رنگ آبی به زرد تبدیل می شود.شدت رنگ در طول موج 450 نانومتر اندازه گیری می گردد.

شدت رنگ رابطه مستقیم با غلظت HCG در نمونه دارد.